文章介绍了高效液相色谱的各个部件及其功能。详细介绍泵，检测器，进样器，色谱柱等。通过介绍高效液相色谱仪，让应用者知道HPLC部件，为以后掌握HPLC使用打下坚实的基础。
首先需要和同学们讲的是HPLC主要测试的是有机物质，无机物质用AAS，UV等光谱仪器，或者用离子色谱测试。
高效液相色谱经常被我们初学者视为高级货。它确实是挺高级的。我们一些高校的实验室，也经常把高效液相色谱当作宝贝里三层外三层小心地保护着。在校的同学们很难一睹其芳容。所以，一些高校的HPLC课程，就是讲授理论，同学们最多集体像看大熊猫一样地排队到实验室看下HPLC。而老师们说，这个仪器很贵的，它是高科技呢。
但是只要我们到一些制药厂，食品企业，高效液相色谱广泛地使用，一个实验员要管理3-4台HPLC呢。为了让同学们了解HPLC，qingqingcao老师准通过自己的体系，给大家讲解一下HPLC的构成。HPLC的简单维护和清洗。同学们可以通过书本，一起来熟悉这台所谓的“高级货”。但是书本很详细地讲了各个部件的原理，也许会枯燥，先听我来讲讲。
HPLC的德行
HPLC的几大系统
HPLC是集成化很高的仪器。它包括了泵输送流动相，六通阀的进样，色谱柱的分离，检测器的检测和记录积分设备的记录和数据计算构成的。Qingqingcao老师首先先给大家一个总的概念，然后详细阐述。
“GC和HPLC的工作原理（形象地解释）
我们回忆一下，气相色谱，我们用氮气或者氦气做载气。“载”这个字，我们怎么理解，载，就是作为介质，带着样品到色谱柱中去“旅游”。有些人个子小，那么在色谱柱这个迷宫里面，跑得快，有些人个子大，容易被色谱柱中的迷宫中的绳索绊住，所以跑得慢。所以，不同性质的物质在载气的带动下，到色谱柱中旅游，快慢不同，从而到达检测器时间不同。达到分离的目的。
那么HPLC呢，同样道理。这里我们把载气换成流动相（Mobilephase）。有些书也称流动相为载液。我们的HPLC是通过管路连接这各个部件按，流动相在泵的驱动下，流经色谱的全系统到达废液，我们可以把它理解成传输带。样品经过了流通阀，进入色谱系统，在流动相的带领下，进入色谱柱进行分离。被分离的样品中各个成分，进入检测器，被检测。由记录仪记录检测信号，流经废液。或者被收集。这是HPLC的整个系统工作描述。
“HPLC的各系统
那么我概括HPLC是有五大系统构成：动力系统，进样系统，分离系统，检测系统，数据分析和记录系统构成。
其中：
动力系统：泵
进样系统：六通阀和进样针，或者自动进样器
分离系统：色谱柱
检测系统：检测器，一般有紫外检测器，荧光检测器，示差折光检测器，MS检测器等等。
记录系统：电脑工作站等
连接这些设备的都是由一根根不锈钢管或者PEEK管构成。
“HPLC的动力系统：泵
泵是HPLC的动力系统。气相色谱的动力，实际上是钢瓶中气体的压力。而液体，它只有通过泵的转动而使之流动。
我们做一个类比：血液类比成流动相，心脏类比成泵。血管类比成各不锈钢管。那么，血液在心脏作为动力系统，流经着身体的各个系统。如果心脏跳得快点，那么血流量加大，那么血压升高。同样，泵流速提高，流动相流量增大，那么色谱系统压力增高；如果血管被压迫半堵了，那么同样的心跳速度，压力也会增高。同样道理，如果色谱系统被污染，那么污染物堵在色谱柱头，或者各连接口等，那么泵同样的流速，就有可能压力变大。高效液相色谱主要出问题的就是压力莫名地增大，一般认为是色谱系统被污染而堵，解决的方法就是查看各个部件，或者用过滤过的异丙醇清洗流路等。
泵的原理，我们看下下面这张示意图。
由四个柱塞杆分别作抽，推运动，吸取贮液瓶中的流动相。想想，医生打针，是否也是抽，推注射器的柱塞杆呢？为什么用了四个柱塞杆呢？目的是为了保持流量的稳定。也就是说，一边抽，一边在推，这样可以减小脉冲。同时，现代的泵的出口流液出，还有一个脉冲调节器，避免由于脉冲引起流速不稳定。我们看下，还有一个purge阀。考下大家purge是什么意思呢？对了是清洗的意思。这个派什么用处的呢？我们思考下，色谱系统不能用很大的流速的，如果用很大流速，那么仪器是否就会有损害？通俗地说，压力高了，设备爆了。一般我们更换流动相和排除流动相中的气泡，需要高流速，快速地更换流动相和排除气泡。那么，我们首先是开purge阀，这样流路走的是一条进废液的路，不会进入色谱柱系统，用5-9mL/min的流速快速更换流动相和排除气泡。更换好并且气泡没有了，那么要停泵，关闭阀门，以正常流速开启泵（例如1.0ml/min）。则流动相能够进入各个色谱系统中。
关于流动相，qingqingcao老师还是需要强调两点，色谱系统不能被污染，尤其是试剂中的固体颗粒是损害HPLC色谱分析的元凶。同时，流动相中的气泡，会是的压力不稳，所以，也要想方设法地排除掉。所以，对于流动相，我们必须对它进行处理。主要有两点。
流动相按照要求配制好。需要进行过滤和脱气。
过滤：对于流动相，我们使用微孔滤膜过滤。微孔滤膜有三种规格。有水系的，有机系的，有水系-有机系两用的。我们过滤水相一般使用水系滤膜。其孔径有0.45微米，0.22微米。一般选用0.45微米孔径。因为0.22微米过滤细菌的。有机相，比如甲醇，乙腈，四氢呋喃等使用有机系滤膜。不要搞混了。因为有机系过滤水相，水流不下来的。有机溶剂用水系滤膜，滤膜会被溶解，黏在多孔瓷板上。如果混合溶剂，一般可以选择水系-有机系两用滤膜。还有，试液一定需要过滤，以前用过的那些HPLC的甲醇，乙腈，过滤出来，上面会有一层浅浅的黄色固体颗粒物，也许会有灰尘等固体颗粒物。如果不幸进入色谱系统，那么会造成不必呀的麻烦。虽然色谱仪器可以拆洗，但是，拆洗总归费时费力吧。
同时流动相需要脱气（degas）。一般脱气有真空脱气，超声波脱气，吹He脱气，加热脱气。常用前两种。当然也有各自有缺点。
问一个问题：流动性为什么要脱气呢？
“HPLC的进样系统
现在很少用到手动进样了吧。大部分都用自动进样。自动进样确实方便，只要安排好配制过的样品的位次，那么开动sequencerun就一个个地分析了。要不说说手动进样吧。进样设备是一个六通阀。其中要进样的时候，需要将六通阀转到load状态，由于六通阀后面装了一根定量环，所以，样品一定以大于三倍定量环体积地进去，这样，保证定量环中充满着样品，可以避免进样误差。打个比方，如果定量环是20μl的，那么我们打入＞60μl的样品。然后转到inj状态，即可。还有需要注意的是，HPLC的进样针是平头针，而GC的进样针一定是尖头针。因为气相进样要刺穿隔垫，需呀尖头，而尖头容易划伤金属，所以HPLC用的是平头针。
“HPLC的分离系统
分离系统是HPLC的核心。我们现实生活中需要分析的样品都是混合物。所以，分离后在分析。比如我们分析酱油中肌苷酸鸟苷酸，那么酱油进行稀释处理，注入色谱仪，肌苷酸，鸟苷酸由于性质不同被分离成两个峰。同时酱油中其他物质也被分离。使得肌苷酸，鸟苷酸两个峰十分清楚地呈现。我们需要清楚的是，样品的测试要保证测试的物质被有效地分离，而不需要测试的物质，没有必要让其分离，这可以节省分析时间。关于色谱柱性能和判断，老师在下一讲详细讲述。
“HPLC的检测系统
HPLC的检测器有紫外-可见检测器，（UV-VIS），荧光检测器（FD）,示差折光检测器（RI）,MS检测器等等对于这些检测器，简单来说，是两点：被检测和浓度越大面积越大。对于示差折光，它是通用性检测器，但是灵敏度不够。测试一些没有紫外基团的物质，比如如糖等。
“HPLC的记录系统
HPLC记录系统主要记录色谱图，并且对色谱图进行面积计算（积分）。同时可以用软件计算出其他，比如峰宽，塔板数，拖尾因子等。同时也可以通过输入称样量和稀释倍数，计算出测试样品中各组分的含量。
总结本节课主要讲述了HPLC的各个部件，详细讲了HPLC泵工作原理，流动相处理等；进样器讲了六通阀等。因为HPLC主要是用的，所以，无需讲许多原理，只要讲为什么这么做就行了。
原标题：高效液相色谱菜鸟扫盲篇
